１）通常の培養法（室温での維持）

　通常は，２〜３日に一度位の頻度で餌を与える。あらかじめ餌を与える前に汚れた培養液の上半分くらいを捨てて（このときアメーバは底にいる），新しい培養液を補充してから餌を与える。テトラヒメナは，一日に食べつくせるくらいの量を与える。
　与える適量をどうやって判断するかだが，これは結局経験的に判断するしかない。目安はアメーバ少なくとも４〜５匹，多ければ十数匹のテトラヒメナを食べて満腹になるので，アメーバの数に対して，十数倍の数のテトラヒメナがいれば充分である。これ以上は，元気のよいアメーバ株なら多少多めでもやがて喰いつくすが，増殖の遅い株などの場合は，食べ残したテトラヒメナによって培養液が劣化してアメーバが死んでしまうこともあるので要注意。
　また，これを続けると，培養している細胞密度にもよるが，しばらくたつとシャーレの底が雑菌の繁殖等により汚れてくる。一般には，かなり汚れても培養液の汚れほどの悪影響はないので焦ってシャーレを交換する必要はない。適宜取り替えるべし。

２）実験に使用する際の培養法（大量に条件のそろった細胞を集める）

　実験の際には，早く，生理的条件の整った大量の細胞が必要になる。この方法はそのような要求にあった培養法である。かなり手間もかかるが，増殖が速く，細胞の状態のよいものが大量に得られるという利点をもつ。
　この方法の１）との違いは，最初に培養液の交換をせず，餌を先に与えること。そして，餌を与えた後，満腹になった細胞がシャーレの底にかたく接着する性質を利用して，その時点で，食べ残したテトラヒメナを残った培液とともにすべて捨ててしまうことにある。この後，新鮮な培養液を与える。その結果，そこには満腹のアメーバと汚れていない培養液だけが残る。
シャーレの底が汚れていた場合は，餌を与える前の細胞は培養液中に浮遊しているので，これらを汚れた培養液とともに新しいシャーレに移す。そのうえで，餌を与える。後の操作を上記と同様に行なえばよい。
　この方法では，培養条件が毎日最適条件に戻されるので，コンディションの揃った細胞を得ることができる。この方法で大量培養も可能となる。
　ただし，既述したように，過剰に与えた場合は，食べ残したテトラヒメナをできるかぎり早目に除去するなどの注意が必要となる。また，テトラヒメナによる培養は，増殖速度が早いと同時に，餌をあたえないでおくと，弱るのも速く，室温では４〜５日以上餌を与えずにおくのは，危険である。
もし，どうしても4〜５日以上餌を与えることができない場合は，下記のキロモナスの場合同様，シャーレに１，２粒の白米を入れておくとよい。

　以上，テトラヒメナ，キロモナス二種の生物を餌に使った場合を，簡単に紹介した。これから後は，テトラヒメナを餌とする培養法（とくに２の実験に使用する際の培養法）について，より詳細に解説する。

培養用塩溶液：
　これは，当研究室では，ＫＣＭと呼ばれているものである。
　以下にその100倍原液の作り方を示す。

　　　　ＫＣｌ　　　　　　　　　0.8　ｇ／Ｌ　　　　　1.6　ｇ／２Ｌ
　　　　ＣａＣｌ2・２Ｈ2Ｏ　　　1.3　　　　　　　　　2.6
　　　　ＭｇＳＯ4・７Ｈ2Ｏ　　　2.5　　　　　　　　　5.0

方 　法

手　順

　（この際，注意すべき点は，あまり培養してから時間のたったものは，用いないこと，また，テトラ細胞を集めるのに強い遠心をしないことである。いずれも，細胞の死骸，あるいは，弱った細胞が混じってくるので，これらがシャ−レの中で溶解すると，アメ−バがガラス底に接着しなくなるので，あとで培養液の交換を行なうのが難しくなる。）

２）アメ−バの入ったシャ−レに上記のテトラヒメナを満腹になるのに適当なくらいの量加える。

　アメ−バの摂食は，直ちに始まるが，しばらくすると多くのテトラは，培養液表面に浮いてしまうので，早く摂食させたい場合は，時々シャ−レを軽くゆすってテトラをシャ−レの底に移動させる。ただし，あまり激しく，かつ，頻繁にやるとアメ−バ自身がシャ−レに接着できなくなり摂食不能になるので，適当に。

３）アメ−バ全部が満腹になったころを見計らって，培養液の交換を行なう。

　上記の方法では，約１時間以内には，ほぼすべての細胞が満腹になるまでテトラ細胞を食べ終える。満腹になったアメ−バ細胞は，内部に沢山のテトラヒメナを入れた状態で，丸くなったまま，シャ−レの底に接着して動かなくなる。そこで，この時に古くなった培養液とともに余分のテトラヒメナをシャ−レをひっくり返して捨てる。つぎに，これに新しい塩溶液を加える。
　ただし，アメ−バの数が多い場合，あるいは，培養の状態が良好でない場合は，一部のアメ−バは，摂食をしないか，あるいは，摂食した後も浮遊したままでいることがある。その場合は，余分であれば，培養液の交換の際に一緒に捨てればよいが，それらもなんとか生かして使いたいという時は，培養液をいったん他のシャ−レに移して，新しい塩溶液を加えるなどしてコンディションを良くしてシャ−レ底に接着するのを待つ。もし，もとのシャ−レでは，細胞の数が多かったために，たまたまうまく接着できなかっただけであれば，ただちに接着するので，新ためて培養液の交換を行なえばよい。しかし，細胞のコンディションが良くないために接着できなかったのであれば，シャ−レを替えても接着できない場合が多いので，その際はあきらめて捨てる。

＊＊給餌，および培養液の交換は，アメ−バを早く増やしたいときは，毎日行なうことになるが，１日，２日おきでもかまわない。３日おきでもほぼ問題はないが，良好なコンディションで培養したいときは，少なくとも１日，２日おきには餌を与えたほうがよい。

＊＊また，何日かすると，シャ−レの底が汚れてくる。アメ−バ細胞のコンディションが良い場合は，特に頻繁にシャ−レ交換をする必要はないが，アメ−バの死骸が混じってきたり，正常な浮遊型でないものがたくさんでている場合は，コンディションが良くないので，早目にシャ−レを新しいものと交換したほうがよい。
　シャ−レの交換は，テトラヒメナを与える直前にシャ−レを軽くたたいて，底にくっついているものを浮遊させたうえで，すべてのアメ−バを汚れた培養液ととも新しいシャ−レに移しかえる。その後，テトラを食べさせればアメ−バだけが底に接着するので，他の汚れなどは，培養液の交換の際に取り除くことができる。

保 　存