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制限酵素・リガ−ゼによる組換え
制限酵素反応条件
基質: pBR322
切断数 酵素名 NaCl TrisHCl (pH) MgCl2 M.E. DDT BSA
1 Bal I - 10 7.5 12 10 - -
31 Hha I - 50 7.9 5 7 - -
0 Sac I - 6 7.5 6 6 - -
0 Kpn I 6 6 7.5 6 6 - -(0.1mg/ml)
26 Msp I 6 10 7.5 10 - 1.0 -
1 Ava I 60 6 7.9 10 6 - -
? Bgl ?
22 Hae カ 50 6 7.5 6 6 - -
( - 6 8.0 6 6 - - )
? Hinf ?
2 Hincキ 60 10 7.5 7 - 1 mM -
( 50 6 8.0 6 60 - - )
1 Pvu キ 60 6 7.5 6 6 - -
3 Rsa I 50 6 7.9 12 6 - -
1 EcoRI 100 mM 100 mM 7.5 5 mM 2 mM - -
0 Stu I 100 10 7.5 10 6 - -
7 Taq I 100 10 8.4 6 6 - - : 65゚C
1 BamHI 150 6 7.9 6 - - -
(100 20 7.0 7 2 - - )
0 BstEキ 150 6 7.9 6 6 - - : 60゚C
0 Mlu I 150 10 7.5 7 6 - -
1 Sal I 150 6 7.9 6 2 - -
0 Xba I 150 6 7.9 6 - - -
0 Xho I 150 6 7.9 6 6 - -
0 Sma I 20 KCl 6 7.9 6 6 - - : 30゚C
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