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電気泳動関連試薬類の調整法
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Buffer | Working sol. | Stock sol. |
Tris-acetate B. | 0.04 M Tris-acetate | 50x Tris-base 242 g |
(TAE) | 0.002M EDTA | 氷酢酸 57.1 ml |
| | 0.5M EDTA 100 ml |
| | pH 8.0 /1000 ml |
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Tris-phosphate B. | 0.08 M Tris-phosphate | 10x Tris-base 108 g |
(TPE) | | phosphate(85%) 15.5 ml |
| 0.008M EDTA | 0.5M EDTA 40 ml |
| | pH 8.0 /1000 ml |
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Tris-borate B. | 0.089M Tris-borate | 5x Tris-base 54 g |
(TBE) | 0.089M boric acid | boric acid 27.5 g |
| 0.002M EDTA | 0.5M EDTA 20 ml |
| | pH 8.0 /1000 ml |
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ゲルの調整
以下の組成は,たて型スラブゲル電気泳動(PAGE)を行なう際のものである。
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<ゲルを20 mlつくる場合>
ゲルの濃度(%) 20.0 17.5 15.0 7.0
30%A.A.+0.8%BIS. 13.4 11.8 10.2 4.2 ml
1.5 M Tris.pH8.8 5.0 5.0 5.0 5.0 ml
10% SDS 0.2 0.2 0.2 0.2 ml
1.5%過硫酸アンモニウム 0.68 0.68 0.68 0.68 ml *fresh!
TEMED 0.01 0.01 0.01 0.01 ml
D. W. 0.7 2.3 3.9 9.9 ml
total: 20 ml 20 ml 20 ml 20 ml
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<ゲルを15mlつくる場合>
ゲルの濃度(%) 20.0 17.5 15.0 7.0
30%A.A.+0.8%BIS. 10.0 8.7 7.5 3.75 ml
1.5 M Tris.pH8.8 3.75 3.75 3.75 3.75 ml
10% SDS 0.15 0.15 0.15 0.15 ml
1.5%過硫酸アンモニウム 0.51 0.51 0.51 0.51 ml *fresh!
TEMED 0.0075 0.0075 0.0075 0.0075 ml
D. W. 0.56 1.88 3.08 6.83 ml
total: 15 ml 15 ml 15 ml 15 ml
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<濃縮ゲルの調整>
10%A.A.+2.5%BIS. 3.0 2.5
0.5 M Tris.pH6.8 3.0 2.5
10% SDS 0.12 0.1
1.5%過硫酸アンモニウム 0.30 0.25
TEMED 0.012 0.01
D. W. 5.57 4.64
total: 12 ml 10 ml *10 mlで十分
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<タンパク質資料液のつくり方・早見表>
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