原生生物情報サーバ
 | 原生生物学情報
 | DataBook
 | 実験プロトコル
電気泳動関連試薬類の調整法
 
  | 
| Buffer | Working sol. | Stock sol.   | 
|  Tris-acetate B.   | 0.04 M Tris-acetate  |  50x  Tris-base  242   g | 
|  (TAE) | 0.002M EDTA  |  氷酢酸   57.1  ml | 
 |    |  0.5M EDTA  100   ml | 
 |    |  pH 8.0   /1000 ml | 
  | 
|  Tris-phosphate B.   | 0.08 M Tris-phosphate  | 10x  Tris-base  108   g  | 
| (TPE) |   |  phosphate(85%) 15.5 ml | 
 | 0.008M EDTA  |  0.5M EDTA   40   ml | 
 |    |  pH 8.0     /1000 ml | 
  | 
|  Tris-borate B.  | 0.089M Tris-borate |  5x  Tris-base   54  g | 
| (TBE)  | 0.089M boric acid  |  boric acid  27.5  g | 
 |  0.002M EDTA  |  0.5M EDTA   20   ml | 
 |    |  pH 8.0     /1000 ml | 
  | 
ゲルの調整
 以下の組成は,たて型スラブゲル電気泳動(PAGE)を行なう際のものである。
---------------------------------------------------------------------------
<ゲルを20 mlつくる場合>
 ゲルの濃度(%)       20.0      17.5      15.0       7.0     
 30%A.A.+0.8%BIS.    13.4    11.8      10.2       4.2      ml
 1.5 M Tris.pH8.8     5.0       5.0     5.0       5.0    ml
 10% SDS         0.2       0.2       0.2       0.2      ml
 1.5%過硫酸アンモニウム    0.68     0.68    0.68      0.68     ml *fresh!
 TEMED          0.01   0.01   0.01   0.01   ml
 D. W.          0.7    2.3    3.9       9.9      ml
      total:    20  ml    20  ml    20  ml    20  ml
---------------------------------------------------------------------------
<ゲルを15mlつくる場合>
 ゲルの濃度(%)       20.0      17.5      15.0       7.0     
 30%A.A.+0.8%BIS.    10.0     8.7       7.5       3.75     ml
 1.5 M Tris.pH8.8     3.75      3.75    3.75      3.75   ml
 10% SDS         0.15      0.15      0.15      0.15     ml
 1.5%過硫酸アンモニウム    0.51     0.51    0.51      0.51     ml *fresh!
 TEMED          0.0075  0.0075  0.0075  0.0075  ml
 D. W.          0.56   1.88   3.08      6.83     ml
       total:      15  ml    15  ml    15  ml    15  ml
---------------------------------------------------------------------------
<濃縮ゲルの調整>
 10%A.A.+2.5%BIS.      3.0      2.5
 0.5 M Tris.pH6.8      3.0      2.5
 10% SDS           0.12     0.1
 1.5%過硫酸アンモニウム      0.30     0.25
 TEMED            0.012     0.01
 D. W.            5.57     4.64
       total:      12   ml   10  ml    *10 mlで十分
---------------------------------------------------------------------------
   <タンパク質資料液のつくり方・早見表>
---------------------------------------------------------------------------
Copyright 1995-2008 
原生生物情報サーバ