大核内封入体の

酢酸ファスト・グリ−ンによる染色法

　まず，細胞を適当にスライドグラスの上に乗せ，乾燥させる。

　このためには，内径 4~5mm程度のガラス管を引いて先が細くなった遠心管（全長 10~12,3cmを作る。これに細胞を入れて，手回し遠心でかるく回す。すると，細胞は細くなった先端部にパックの状態で集まる。この部分を取り出すには，先のさらに細くかつ長いピペットで吸い取るわけだが，そのピペットは，自分で作らなくとも，パスツ−ルピペットの長いタイプものがちょうどよい長さをしているので，これを利用することができる。取り出したものは，すぐにカバ−グラス上に塗布する。
　通常，試験管から直接取り出して塗布したのでは，顕微鏡で覗いた際に視野の中に均一に，かつ，十分な数の細胞を観察することはできない。上記のようにすると，かなり細胞濃度の高い状態で，カバ−グラスに塗布できるので，それが可能となり，以後の検鏡を効率的に行なうことができる。

　つぎに，上のサンプルを染色するわけだが，それは以下のステップで行なう。

酢酸ファストグリーン染色により検出された大核内封入体

手順

1. カルノア固定（　10分　）
2. DWによるカルノアの除去（　5分 x 2〜3　）
   特に，カルノア中のエタノ−ルの除去を完全にすることが大切。
   エタノールの除去が不完全だと封入体は染まらない。
3. 酢酸ファスト・グリ−ン染色（　10分　）
4. DWによる洗浄（　5分 x 2〜3　）
5. 乾燥　 （普通，染色の途中では乾燥さないが，この方法ではいっこうに差し支えない）
6. キシロ−ルにつける
7. Enteran Neu を 1~2滴落として包埋。カバ−グラスをかぶせて封入。

酢酸ファスト・グリ−ン染色液のつくり方

酢酸	50　容量
DW	50　容量
粉末のファスト・グリ−ン	適量

（ファスト・グリ−ンは多少とも透き通った状態でなくなるまで加える）

単離大核のFastGreen染色像