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制限酵素・リガ−ゼによる組換え

 制限酵素反応条件
 基質: pBR322

切断数 酵素名    NaCl TrisHCl (pH) MgCl2 M.E. DDT BSA
 1  Bal I   -   10   7.5  12   10    -  -
31  Hha I   -   50   7.9   5    7    -  -
 0  Sac I   -    6   7.5   6    6    -  -

 0  Kpn I   6    6   7.5   6    6    - -(0.1mg/ml)
26  Msp I   6   10   7.5  10    -   1.0  -

 1  Ava I  60    6   7.9  10    6    -  -
 ?  Bgl    ?
22  Hae カ  50    6   7.5   6    6    -  -
           ( -    6   8.0   6    6    -  - )
 ?  Hinf   ?
 2  Hincキ  60   10   7.5   7    -   1 mM -
          ( 50    6   8.0   6   60    -  - )
 1  Pvu キ  60    6   7.5   6    6    -  -
 3  Rsa I  50    6   7.9  12    6    -  -

 1  EcoRI  100 mM 100 mM 7.5 5 mM 2 mM   - -

 0  Stu I  100   10   7.5  10    6    -  -
 7  Taq I  100   10   8.4   6    6    -  - : 65゚C

 1  BamHI  150    6   7.9   6    -    -  -
          (100   20   7.0   7    2    -  - )
 0  BstEキ  150    6   7.9   6    6    -  - : 60゚C
 0  Mlu I  150   10   7.5   7    6    -  -
 1  Sal I  150    6   7.9   6    2    -  -
 0  Xba I  150    6   7.9   6    -    -  -
 0  Xho I  150    6   7.9   6    6    -  -

 0  Sma I  20 KCl   6   7.9   6    6    -  - : 30゚C

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